免疫共沉淀（CO-IP）

概述

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法，属于免疫沉淀技术的一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是，假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员，那么利用这种蛋白的特异性抗体，就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来（常说的“pull-down”），进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他未知成员。

免疫共沉淀的特点可以概括为两点，第一是天然状态，第二是蛋白复合物。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。

技术路线

1、裂解细胞

2、取少量裂解液做input，剩余裂解液将相应的抗体加入到细胞裂解液，摇晃孵育过夜

3、将预处理过的protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4℃ 缓慢摇晃孵育4h

4、将琼脂糖珠离心；去上清，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗；

5、加入上样缓冲液，沸水煮5分钟

6、Western blotting或质谱仪分析。

客户提供：

1、实验方案裂解的蛋白或组织（细胞）样本

2、IP级一抗（或由我方代购）

研拓生物提供：

1.   实验影响资料

2.   实验报告（实验仪器及厂家；实验试剂及厂家批号；实验步骤；实验结果）；

3、原始实验图片及数据