CRISPR/Cas9 基因敲除技术服务

 

    Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）/Cas9是细菌和古细菌不断进化而获得的免疫防御机制，其中II型CRISPR/Cas9免疫系统依赖Cas99内切酶家族靶向和剪切外源DNA。CRISPR/Cas9系统通过小导向RNA(sgRNA) 对切割区域进行识别，进而利用Cas9内切酶实现靶向区域的切割以产生DNA双链断裂。 该系统灵活简单，可实现多个靶点的同时操作。CRISPR/ Cas9系统用小 RNA 来识别并剪切DNA以降解外来核酸分子，并可在局部实现非同源重组与同源重组，已成为高效的基因敲除工具，在二个月内即可获得基因敲除小鼠或在人源化的细胞上实现定点敲除，这是继ZNF技术、TALENS技术后， 第三代基因敲除技术。

    我们利用该技术，定点敲除和修饰各种细胞系中的特定基因。对打靶细胞进行药物筛选，利用CRISPR/Cas9系统获得的基因敲除细胞的剔除效率会明显高于常规的利用RNAi和shRNA介导的基因敲落。

 

服务内容：

应用CRISPR /Cas9提供稳定细胞系靶向基因敲除、敲入 

 

技术特色：

1. 可实现多个靶基因位点及多个基因的同时敲除

2. 无种属限制，适用于各种细胞系的靶向敲除

3. 服务周期短。

 

服务流程及周期： 

1. 靶向目标序列gRNA的设计及载体构建

2. 目标细胞系共转染

3. 阳性细胞株的筛选和鉴定

 

服务范围：

基因功能分析：在细胞水平研究基因的功能

定点突变：:建立点突变细胞，可用于药物靶点研究。

启动子功能分析：该方法建立的启动子分析系统，可有效地分析内源性启动子的强度，是一种最理想的分析系统。