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tunel

TUNEL检测的原理:
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP (fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
实验流程:
1.洗载玻片
2.包埋组织
3.切片
4.捞组织
5.脱蜡水化
6.血清封闭
7.蛋白酶K孵育破膜
8.加TUNEL反应混合液孵育
9.加POD转化试剂
10.加DAB底物显色
11.复染
12.脱水
13.封片
客户提供:
固定液固定的组织或者包埋的蜡块
研拓生物提供:
包埋,切片,染色,病理评价
最终结果:
1. 染色后的片子
2. 原始图片采集
3. 实验报告(主要仪器及试剂说明,实验步骤,实验结果)


