技术服务

tunel

 

 

TUNEL检测的原理:

    细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP (fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

 

 

实验流程:

1.洗载玻片

2.包埋组织

3.切片

4.捞组织

5.脱蜡水化

6.血清封闭

7.蛋白酶K孵育破膜

8.加TUNEL反应混合液孵育

9.加POD转化试剂

10.加DAB底物显色

11.复染

12.脱水

13.封片

 

 

客户提供:

固定液固定的组织或者包埋的蜡块

 

 

研拓生物提供:

包埋,切片,染色,病理评价

 

 

最终结果:

1. 染色后的片子

2. 原始图片采集

3. 实验报告(主要仪器及试剂说明,实验步骤,实验结果)