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甲基化检测
甲基化检测
DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞嘧啶多位于CpG岛上。甲基化特异性PCR (MSP)是一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理,非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时,设计两套不同的引物对:一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点发生了甲基化;另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点没有甲基化。两对引物都具有很高的特异性,与未经处理的DNA序列无互补配对。
试验流程:
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序号 |
相关服务 |
周期 |
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1 |
序列分析及MSP引物设计 |
1周 |
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2 |
基因组DNA抽提及体外甲基化处理 |
1周 |
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3 |
MSP |
1周 |
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4 |
MSP产物测序(可选) |
1周 |
相关要求(客户提供):
1、 客户提供待测基因准确信息序列或NCBI序列链接;
最终结果:
1、MSP产物电泳图;
2、实验报告(实验步骤,主要仪器及试剂说明,批号)
相关结果分析:
(1) 甲基化分析,筛选差异甲基化位点;
(2) 基因启动子区域甲基化位点分析;
(3) CpG岛区域甲基化水平差异分析。

