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甲基化检测

 甲基化检测

    DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5位,形成5-甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞嘧啶多位于CpG岛上。甲基化特异性PCR (MSP)是一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理,非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时,设计两套不同的引物对:一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点发生了甲基化;另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化DNA链设计,若用该对引物能扩增出片段,说明该检测位点没有甲基化。两对引物都具有很高的特异性,与未经处理的DNA序列无互补配对。

 

试验流程:

序号

相关服务

周期

1

序列分析及MSP引物设计

1周

2

基因组DNA抽提及体外甲基化处理

1周

3

MSP

1周

4

MSP产物测序(可选)

1周

 

相关要求(客户提供):

1、 客户提供待测基因准确信息序列或NCBI序列链接;

 

最终结果:

1、MSP产物电泳图;

2、实验报告(实验步骤,主要仪器及试剂说明,批号)

 

相关结果分析:

 (1) 甲基化分析,筛选差异甲基化位点;

(2) 基因启动子区域甲基化位点分析;

(3) CpG岛区域甲基化水平差异分析。